质粒的准备:在5%zui终培养体积的DMEM或培养基中,每106个细胞稀释0ugpDNA。PEI的准备:在5%zui终培养体积的DMEM或培养基中,每106个细胞稀释0ugPEIPrime,混匀通过快速,短暂涡旋或颠倒数次试管,将pDNA和PEIPrime溶液混合在一起.使pDNA和PEI的混合物在室温下静置10分钟!一边旋转板,一边将pDNA和PEI混合物逐渐滴加到细胞中!于37℃CO2培养箱中培养.
PEI是Polyethyleneimine的缩写。在pH中性溶液中具有极gao正电荷密度的合成聚合物!带正电的PEI与带负电的DNA牢固结合,并赋予净阳离子电荷,使DNA进入细胞。当下,PEI是流行的瞬时转染试剂HEK293和CHO悬浮培养液.而serochem旗下的PEIPrime™是一种高性能转染试剂,旨在实现高产量,可重复性,和可扩展的瞬时基因表达,且其是生产任何具有成本效益的生物制剂的很好选择,包括重组蛋白,抗体和病毒!
转染过程在转染前2h,换掉原有的培养基,更新为新鲜的完全培养基!制备DNA稀释液!向DNA稀释液中直接加入转染试剂,室温静置10~15min!转染复合物配制完成.将转染复合物加入细胞培养基中,轻柔混匀!继续培养24~48h,收取细胞进行鉴定或加入相应抗生素筛选稳定克隆.使用本产品转染后一般在24h开始进入表达高峰期,36~48h达到表达高峰.与市场领xian的PEI转染效率的对比:使用PEIPrime(PEI:DNA浓度比3:1)或某知ming品牌PEI,用CMV-SEAP质粒转染20ml含HEK293悬浮细胞的培养物。
PEI带有正电荷,DNA带有负电荷,PEI与DNA牢固结合在一起,促进DNA进入细胞!AdvancedBiomart提供的线性PEI转染试剂是一种粉末状的高性能转染试剂,实现瞬时基因表达,从而实现高、可重复、可扩展的特性.应用范围:转染的细胞类型多,悬浮细胞和贴壁细胞也能转染,转染效率高,特别是在HEK293和CHO悬浮细胞中转染效率极gao!适用于包括抗体、病毒、重组蛋白等生物制剂的制备过程中.产品特点:毒性低、效能高易操作,性价比gao转染效果可重复、可扩展快速、高通量转染过程中普遍适用操作流程(以6孔板为例):细胞铺板:头天将细胞种植在六孔板中,以转染时细胞密度在70%~80%为宜。
所有生物试剂耗材都可以进口,特别是冷门品牌,价格优,货期短,可加急!大部分客户我们提供货到付款服务,百奥创新自成立依靠过硬的服务和良好的信誉与各大企事业单位、科研单位建立长期合作.专业订购国内外试剂耗材,常备现货,一手货源,欢迎合作.聚乙烯亚胺线性PEI转染试剂PEIPrimePowder,TransfectionGradeLinearPolyethylenimine是带有正电荷的合成聚合物(在PH中性溶液中).
湖北进口转染试剂销售
线性PEI转染试剂PEIPrimePowder,TransfectionGradeLinearPolyethylenimine是以一种阳离子高分子聚合物-聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)为载体的基因转染试剂。PEI是在pH中性溶液中具有极gao正电荷密度的合成聚合物.带正电的PEI与带负电的DNA牢固结合,并赋予净阳离子电荷,使DNA进入细胞。线性PEI转染试剂PEIPrimePowder,TransfectionGradeLinearPolyethylenimine是一种高性能转染试剂,利用PEI的特性旨在实现高产量,可重复性和可扩展的瞬时基因表达!

apoptotic细胞的百分比被藉由以AnnexinV。在mitochondrial膜电位方面的改变沾染估计被藉由用tetramethylrhodamine甲基酯(TMRM)(希腊文的第十八个字母∑)使用在裁判员被描述的方法沾染细胞检测。19与一些修正。
简短地,每个样品(1x106个细胞)在三测试管中被分开:(一)控制GFP,(b)TMRM、和(c)phycoerythrin-结合的AnnexinV,而且在37vH((b))或在室温((一)和)抱了1x装订缓冲的15分钟。(BD生物学) 所有的样品在 FACSCalibur 流程 cytometer 上被分析。
(BD 生物学) 。